La recherche de gènes impliqués dans la pathogénie du champignon Magnaporthe grisea a été réalisée en analysant une collection de mutants obtenus par mutagenèse insertionnelle à l'aide de plasmides intégratifs. Parmi les 3000 transformants REMI analyses, nous avons identifié 32 mutants, soit non-pathogènes (n: 10), soit ayant une pathogénie réduite (n: 22) vis-à-vis du riz et de l'orge. Seuls 30% des mutants sont étiquetés. Nous avons approfondi l'étude du mutant non-pathogène punchless. Ce mutant différencie des appressoria mélanisés qui sont incapables de pénétrer dans la feuille. Ce défaut de pénétration est dû à une absence de différenciation de l'hyphe de pénétration chez l'appressorium mutant, malgré une organisation cellulaire, un contenu en glycogène et une pression normale. La protéine de 225-aa déduite de l'ORF interrompue par le plasmide chez le mutant punchless, code pour une nouvelle protéine membranaire (Plslp) qui appartient à la super famille des tétraspanines. Les tétraspanines appartiennent à des complexes membranaires de signalisation comportant souvent des intégrines qui contrôlent des processus de différenciation cellulaire impliqués dans le mouvement et l'adhésion cellulaire chez les animaux. Ce type de voies de signalisation pourrait être impliqué dans la différenciation de l'hyphe de pénétration. Le profil d'expression et la localisation cellulaire de cette protéine ont été étudiés afin de mieux connaître la fonction des tétraspanines dans le processus de pénétration appressoriale. La protéine Plslp n'a été détectée que dans les appressoria lors de la pénétration. La localisation intra-cellulaire de Plslp et ses caractéristiques biochimiques seront présentées.