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Extraction and purification of total RNA from banana tissues (small scale)

Mbéguié-A-Mbéguié D., Fils-Lycaon B., Chillet M., Hubert O., Galas C., Gomez R.M.. 2008. Fruits, 63 (4) : p. 255-261.

DOI: 10.1051/fruits:2008020

Introduction. Le protocole vise à préparer de l'ARN total pour l'étude de l'expression de gènes par les techniques de Northern Blots, de Reverse Transcription PCR, et de PCR quantitative en temps réel ; pour l'isolement de cDNA par Reverse Transcription PCR ; pour la construction de bibliothèque de cDNA. Le principe, les principaux avantages, le matériel végétal requis, le temps nécessaire à l'obtention de l'ARN total et les résultats escomptés sont présentés. Matériel et méthodes. Cette partie décrit le matériel et les 27 étapes nécessaires pour préparer l'ARN à partir de tissus de peau et de pulpe de banane : préparation de la poudre de tissus végétaux, préparation du tampon d'extraction de l'ARN total, isolement de l'ARN à partir du tissu de banane broyé. Résultats. L'extraction de l'ARN total par la méthode décrite permet de réaliser son électrophorèse avec un gel à base de formaldéhyde comme dénaturant et sa transcription réverse in vitro. Un exemple d'application de Northern Blots est donné. (Résumé d'auteur)

Mots-clés : banane; musa; arn; purification; extraction; pulpe de fruits; tissu végétal; pcr

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