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Culture in vitro de candidatus Liberibacter asiaticus, une a-proteobactérie associée au Greening des agrumes : [N° 20]

Fontaine-Bodin L., Gatineau F., Fabre S., Dollet M.. 2010. In : Neuvièmes Rencontres plantes-bactéries, 18-22 janvier 2010, Aussois (France) : résumés. Paris : SFP, p. 86-86. Rencontres plantes-bactéries. 9, 2010-01-18/2010-01-22, Aussois (France).

La maladie du Huanglongbing (HLB) ou Greening, s'attaque aux agrumes et se propage par insecte-vecteur de type psylle ou par greffe. Cette maladie est présente en Afrique, Moyen Orient, Asie, Brésil et en Floride. Elle est une grave menace pour le bassin méditerranéen. La maladie du HLB est associée à la présence d'une bactérie intra-phloèmique, une aprotéobactérie nommée Candidatus Liberibacter spp. Son rôle éthologique dans la maladie du HLB reste à démontrer selon le postulat de Koch. A cette fin, l'établissement d'une culture pure de Liberibacter est indispensable, ainsi que pour l'étude de sa physiologie, de son métabolisme et de son pouvoir pathogène. De récentes avancées ont été obtenues au niveau de sa culture (Sechler et al., 2009) mais celle-ci reste limitée. Nous nous proposons de tester différentes cultures cellulaires d'insectes pour obtenir une primo culture de Liberibacter, la maintenir et permettre sa croissance in vitro. Différentes lignées cellulaires d'insectes ont été inoculées. A ce jour, nous avons pu obtenir et détecter la présence de Candidatus Liberibacter asiaticus (LAS) dans une de nos lignées cellulaires d'insectes. La bactérie est détectable jusqu'à 15 jours après inoculation et après transfert de la lignée cellulaire. Afin de maintenir LAS sur une période plus longue et d'obtenir de plus fortes concentrations bactériennes, nous analysons les voies métaboliques révélées par le séquençage de LAS afin d'améliorer les conditions de culture et d'identifier les facteurs limitants, et/ou inhibiteurs de la croissance de cette bactérie. De nouvelles lignées cellulaires d'insectes sont à l'étude ainsi que des milieux alternatifs. Les résultats de ces études sont présentés. Après axénisation, ces cultures in vitro de LAS permettront l'inoculation de plants sains et la vérification, par le postulat de Koch, de sont rôle dans la maladie du HLB. Avec ces cultures, l'analyse des interactions bactéries-cellules d'insectes pourra être entreprise. (Texte

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