La mise à la reproduction de l'ânesse est assez tardive (2 à 4 ans) mais peut se poursuivre après 20 ans. La reproduction est possible toute l'année, avec des variations saisonnières près de l'équateur. En France la saison sexuelle s'étend de mars à septembre. Les cycles sexuels normaux durent 3 semaines, les chaleurs 3-4 (2-10) jours et la gestation 12,5 mois environ. Les mâles sont mis à la reproduction vers 3 ans avec 1 mâle pour 30-40 femelles avec des males jeunes et 60-70 avec des mâles âgés. L'insémination artificielle est possible, surtout pour sauvegarder des races à faibles effectifs ou pour produire des mulets. La semence peut être utilisée fraîche, réfrigérée ou congelée. La fertilité est souvent relativement basse, même en saillie naturelle. Le mulet et la mule, produits de l'hybridation d'un âne et d'une jument, sont rustiques, apte au transport et au travail. Lorsque l'âne montre peu d'intérêt à saillir la jument en chaleurs, le brelandage consiste à l'encourager par divers artifices. Les mulets sont toujours stériles. Très rarement les mules peuvent être fécondées par un âne ou un étalon.