La présente invention concerne un procédé de préparation d'ester d'acide ricinoléique à partir d'une huile végétale pure en mélange, notamment l'huile de ricin, ledit procédé comprenant au moins une étape de transestérification enzymatique réalisée en présence d'un alcool léger et au moyen d'une lipase typosélective, et conduisant à l'obtention d'une fraction enrichie en ester d'acide riciloléique. Le procédé de production d'ester d'acide ricinoléique selon l'invention comprend les étapes suivantes : i) une première réaction de transestérification effectuée en présence d'un alcool léger et de la lipase extraite de Geotrichum candidum, conduisant à l'obtention d'un mélange M comprenant des mono-, di- et triglycérides d'AR, esters d'acides gras autres que l'AR, alcool ; ii) une étape de séparation dudit mélange M en au moins deux fractions, dont une fraction A enrichie en glycérides d'AR, et une fraction B riche en esters d'acides gras autres que l'AR ; iii) une étape de transformation desdits glycérides d'AR en esters d'AR formant une fraction C riche en esters et une fraction en alcools.