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Contribuição ao estudo proteômico do ciclo de vida de Moniliophthora perniciosa

Corbeau C., Santos Carvalho H.A., Camillo L.R., Santos Gomes D., De Mattos Cascardo J.C., Pirovani C.P., Micheli F.. 2009. In : XV Seminario de Iniciaçao Cientifica e X Semana de Pesquisa e Pos-Graduaçao, Ilheus, Brazil, 20-23 de octubre 2009. s.l. : s.n., 1 p.. Seminário de Iniciação Científica. 15, 2009-10-20/2009-10-23, Ilhéus (Brésil).

Moniliophthora perniciosa é o fungo causador da vassoura de bruxa no cacaueiro (Theobroma cacao L.). Ele apresenta um ciclo de vida hemibiotrófico, com uma fase biotrófica e uma fase necrotrófica. A fase biotrófica, iniciando a doença, é caracterizada por um micélio monocariótico, enquanto a fase necrotrófica é caracterizada por um micélio dicariótico levando a morte dos tecidos vegetais. O estudo da fase necrotrófica é efetuado em bolacha, o único meio sólido permitindo a obtenção de basidiomas e, por conseqüência, das únicas estruturas infecciosas do fungo, os basidiósporos. Durante o cultivo de M. perniciosa em bolachas, 6 diferentes fases de desenvolvimento foram observadas: i) a fase branca, fase inicial do cultivo do fungo (? 35 dias); ii) a fase amarela (? 37 dias) ; iii) a fase rosa (? 40 dias) ; iv) a fase rosa escuro, ou pre-estresse hídrico (? 45 dias); v) o primórdio (? 60 dias) ; e vi) o basidioma (? 75 dias). O objetivo deste trabalho foi de identificar proteínas específicas envolvidas em cada uma destas fases, em particular na fase de formação do basidioma e na fase de estresse hídrico necessaria e preliminar à formação do corpo de frutificação. Foi estabelecido um método de extração de proteínas a partir das bolachas, e em seguida, foram utilizadas técnicas de eletroforese (SDS-PAGE e eletroforese bidimensional/2-D) a fim de identificar perfis protéicos específicos de cada fase. Bandas (SDS-PAGE) ou spots (2-D) visualizados por eletroforese foram em seguida cortados dos geis e analisados por espectrometria de massas. Foram identificadas varias proteínas potencialmente envolvidas na formação do basidioma, e podendo constituir bons candidatos para futuras análises necessárias à compreensão do modo de propagação do fungo.

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